用無卵黃胰蛋白胨亞硫酸鐵檸檬酸鹽杯絲氨酸瓊脂Shahidi和Ferguson多黏菌素卡那霉素亞硫酸鹽瓊脂或新莓素血瓊脂對系列稀釋物進(jìn)行平板計(jì)數(shù)。對于SICA和 SFA瓊脂,既可采用加人lmL稀釋液后倒平板的方法（lOmL培養(yǎng)基），也可在預(yù)先干燥或倒好的平板上進(jìn)行表面接種。新霉素血瓊脂平板應(yīng)預(yù)先倒好平板，干燥后進(jìn)行表面接種。所有平板在35或37：厭氧培養(yǎng)24h在MCA和SFA瓊脂上，可疑產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌的菌落延黑色的（亞硫酸鹽還原 產(chǎn)生硫化鐵沉淀)。

 

 

在新霉素血(牛、馬或人血)瓊脂上，產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌的菌落產(chǎn)生-圏狹窄的完全溶血帶（形成毒素），在溶血帶外又形成一圏狹窄的非完全溶血帶挑選可疑的產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿搿菌落，穿刺接種至含有0.3%瓊脂的硝酸鹽蛋白胨水試管，也可以在Willis乳糖卵黃牛乳瓊脂上劃線接種,預(yù)先將幾滴產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿繭的抗毐崠噴灑每個平板的一半，干燥后，在整個平板上劃線接種。還可以將可疑菡落在血瓊脂平板上劃線。

 

 

將硝酸鹽瓊脂試管及Willis和fiobbs培養(yǎng)基置37厭氧培養(yǎng)24h。血瓊脂平板置 于37需氧培養(yǎng)24h培養(yǎng)后，觀察硝酸鹽瓊脂中菌體的生長情況(指菌體運(yùn)動），并測試硝酸鹽的還原量選取Willis/Hobbs培養(yǎng)基上生長的菌株進(jìn)行革蘭氏染色后鏡檢。產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌為革蘭氏染色陽性、不運(yùn)動桿菌,并能還原硝酸鹽。

 

 

通過以下實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證:觀察WmWHobbs培養(yǎng)基上的菌落——產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌在平板無抗毒素的部分，菌落周圍有一圈霧狀帶，在有抗毒素的區(qū)域不形成霧狀帶。另外該菌可發(fā)酵乳糖在血瓊脂需氧培養(yǎng)時，該菌不生長。