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常用消毒滅菌除菌器的使用

 微生物廣泛存在于周圍環境中,其中有些又是病原微生物,從預防感染出發,醫務工作者必須嚴格執行無菌操作,對所用的物品和工作環境進行消毒滅菌,確保醫療與科研正常進行。

消毒滅菌主要是通過理化因素使微生物的主要代謝發生障礙,或菌體蛋白質變性凝固,或破壞其遺傳物質,導致微生物死亡。這里主要介紹物理因素殺滅微生物的幾種方法,以及相關器材的使用。

 

(一)高壓蒸汽滅菌器

 

1. 構造:高壓蒸汽滅菌器是一個雙層的金屬圓筒,兩層之間盛水,外層堅固厚實,其上方有金屬厚蓋,蓋旁附有螺旋,借以緊閉蓋門,使蒸汽不能外溢,因而蒸汽壓力升高,隨著其溫度亦相應地增高。

 

高壓蒸汽滅菌器上裝有排氣閥門、安全活塞,以調節蒸汽壓力。有溫度計及壓力表,以表示內部的溫度和壓力。滅菌器內裝有帶孔的金屬擱板,用以放置要滅菌物體(圖3-1)。
2. 用法:加水至外筒內,被滅菌物品放入內筒。蓋上滅菌器蓋,擰緊螺旋使之密閉。滅菌器下用煤氣或電爐等加熱,同時打開排氣閥門,排凈其中冷空氣,否則壓力表上所示壓力并非全部是蒸汽壓力,滅菌將不完全。

 

待冷空氣全部排出后(即水蒸氣從排氣閥中連續排出時),關閉排氣閥。繼續加熱,待壓力表漸漸升至所需壓力時(一般是101.53 kPa,即15磅/英寸2,溫度為121.3℃),調解爐火,保持壓力和溫度(注意壓力不要過大,以免發生意外),維持15~30 min。滅菌時間到達后,停止加熱,待壓力降至零時,慢慢打開排氣閥,排除余氣,開蓋取物。切不可在壓力尚未降低為零時突然打開排氣閥門,以免滅菌器中液體噴出。

 

高壓蒸汽滅菌法為濕熱滅菌法,其優點有三:一濕熱滅菌時菌體蛋白容易變性,二濕熱穿透力強,三蒸氣變成水時可放出大量熱增強殺菌效果,因此,它是效果最好的滅菌方法。凡耐高溫和潮濕的物品,如培養基、生理鹽水、衣服、紗布、棉花、敷料、玻璃器材、傳染性污物等都可應用本法滅菌。

 

目前已出現全自動電熱高壓蒸汽滅菌器,操作簡單,使用安全。

 

(二)干熱滅菌器(烤箱)

 

1. 干熱滅菌器是由雙層鐵板制成的方形金屬箱,外壁內層裝有隔熱的石棉板。箱底下放置大型火爐,或在箱壁中裝置電熱線圈。內壁上有數個孔,供流通空氣用。箱前有鐵門及玻璃門,箱內有金屬箱板架數層。電熱烤箱的前下方裝有溫度調節器,可以保持所需的溫度。

 

2. 用法:將培養皿、吸管、試管等玻璃器材包裝后放入箱內,閉門加熱。當溫度上升至160~170℃時,保持溫度2 h,到達時間后,停止加熱,待溫度自然下降至40℃以下,方可開門取物,否則冷空氣突然進入,易引起玻璃炸裂;且熱空氣外溢,往往會灼傷取物者的皮膚。一般吸管、試管、培養皿、凡士林、液體石蠟等均可用本法滅菌。

 

(三)除菌濾器

 

除菌濾器簡稱濾菌器。種類很多,孔徑非常小,能阻擋細菌通過。它們可用陶瓷、硅藻土、石棉或玻璃屑等制成。下面介紹幾種常用的濾菌器。

1. 構造
①賽氏(Seitz)濾菌器(圖3-2):由三部分組成。上部的金屬圓筒,用以盛裝將要濾過的液體;下部的金屬托盤及漏斗,用以接受濾出的液體;上下兩部分中間放石棉濾板,濾板按孔徑大小可分為三種:K濾孔最大,供澄清液體之用;EK濾孔較小,供濾過除菌;EK-S濾孔更小,可阻止一部分較大的病毒通過。濾板依靠側面附帶的緊固螺旋擰緊固定。

 

②玻璃濾菌器(圖3-3):由玻璃制成。濾板采用細玻璃砂在一定高溫下加壓制成。孔徑由0.15~250 μm不等,分為G1、G2、G3、G4、G5、G6六種規格,后兩種規格均能阻擋細菌通過。

 

③薄膜濾菌器(圖3-4):由塑料制成。濾菌器薄膜采用優質纖維濾紙,用一定工藝加壓制成。孔徑:200 nm,能阻擋細菌通過。

 

2.用法:將清潔的濾菌器(賽氏濾菌器和薄膜濾菌器須先將石棉板或濾菌薄膜放好,擰牢螺旋)和濾瓶分別用紙或布包裝好,用高壓蒸汽滅菌器滅菌。再以無菌操作把濾菌器與濾瓶裝好,并使濾瓶的側管與緩沖瓶相連,再使緩沖瓶與抽氣機相連。

將待濾液體倒入濾菌器內,開動抽氣機使濾瓶中壓力減低,濾液則徐徐流入濾瓶中。濾畢,迅速按無菌操作將濾瓶中的濾液放到無菌容器內保存。濾器經高壓滅菌后,洗凈備用。   

3.用途:用于除去混雜在不耐熱液體(如血清、腹水、糖溶液、某些藥物等)中的細菌。

 

(四)紫外線燈的使用

 

紫外線中波長為240~280 nm者具有殺菌能力,其中265~266 nm的殺菌作用最強。醫學上常使用紫外線燈產生紫外線進行消毒滅菌。常用的是水銀燈,燈管由石英玻璃制成,管內充滿壓強為266 Pa的氬和幾滴水銀。

其殺菌作用主要是因為DNA吸收了紫外線引起胸腺嘧啶形成二聚體,從而干擾了DNA的復制,輕則發生突變,重則導致死亡。紫外線殺菌力強而穩定,但穿透力弱,不能透過普通玻璃和有色紙張,因此,只適用于直接照射的物體表面消毒或空氣消毒。

 

使用方法:將涂有細菌的平皿放置在距紫外線60~100 cm處,直接受紫外線照射30 min后,37℃孵育24h后觀察生長情況。

 

結果:紫外燈管直接照射處無菌生長,如用玻璃和黑紙遮蓋,則有菌生長。
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