人單核細胞白血病細胞（THP-1）介紹：人單核細胞白血病細胞（THP-1）對乳汁珠和激活的紅細胞有吞噬作用，無表面和胞質免疫球蛋白。可以用佛波醇 TPA誘導單核細胞分化。
1） 來源：急性單核細胞白血病，單核細胞
2） 形態：單核細胞，懸浮
3） 含量：>1x106
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。
人單核細胞白血病細胞（THP-1）用途：僅供科研使用。
細胞接收后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查發貨培養瓶的狀況，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時，最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態的依據。
3） 觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。
4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象，如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長，可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基的原培養瓶中（或新的培養瓶中）。
5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中（加入按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基）。
6）備注：T25培養瓶運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議1：2傳代 。
一．人單核細胞白血病細胞（THP-1）培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養基；優質胎牛血清，10%；0.05 mM β－巰基乙醇；雙抗，1%。
2） 參考傳代比例：傳代時控制細胞密度在2-4 ×105cell / mL，并在細胞生長至8-10 ×105cell / mL時進行傳代。
3） 參考換液頻率：傳代時換液
4） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
5） 凍存液：完全培養液95%，DMSO 5%（使用該凍存液后，按照我庫的經驗復蘇存活率約50%，復蘇后需要額外培養7-10天才能恢復生長）
6） 【注意事項】：
a) 該細胞為懸浮細胞，根據培養經驗以及客戶的反饋，傳代時使用【半換液法】對細胞狀態較為有利，因此我庫建議您使用【半換液法】進行傳代。同時，您在收到細胞后，請不要通過離心的方式收集細胞，可以直接向培養瓶中添加等體積的新鮮培養液，然后將細胞吹打均勻后移入兩個新的T25培養瓶中繼續培養即可。
b) 細胞對血清質量較為敏感，我庫建議您使用進口大品牌優質血清進行培養。
c) 該細胞的培養液中需添加β-巰基乙醇（細胞培養級別，可參考細胞說明書中的品牌、貨號），若不添加，可能會對細胞狀態造成影響。
d) 該細胞對細胞密度較為敏感，培養、傳代時請注意保持細胞密度在合適的范圍（具體請參考細胞說明書）。
e) 該細胞凍存后復蘇率較低，凍存時請酌情提高細胞量
ATCC有關thp-1細胞保持細胞活力的說明
https://www.atcc.org/support/faqs/2ed94/Seeding%20density%20for%20TIB-202.aspx?device=modal
（thp-1懸浮細胞。這些細胞更喜歡條件培養基和溫和處理，而不是離心和全培養基更換。添加細胞培養基以稀釋細胞至維持密度。
頻繁的細胞計數是監測thp-1的最佳方法。這些細胞應該每2至3天通過向燒瓶中簡單加入少量新鮮培養基（使它們具有條件培養基）來培養。您不需要每次都離心細胞并重新傳代。當在我們的實驗室中培養時，到第2天，細胞通常可以擴增到具有更多培養基的更大的燒瓶中。當細胞密度達到8×10 5個活細胞/ ml時需要進行傳代。不允許細胞密度超過1×10（6）活細胞/ ml。）
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：傳代時控制細胞密度在2-4 ×105cell / mL，并在細胞生長至8-10 ×105cell / mL時進行傳代。
3） 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
1，細胞凍存時，取上清，可使用血球計數板計數。
2，4min ，1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入凍存液，輕輕混勻，DMSO終濃度為5%，細胞密度2x106/支，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
