波多野结衣毛片-乳色吐息在线观看-国产伦子伦对白视频-性做久久久-狠狠干2019-黄色裸体片-美女无遮挡免费网站-国产91熟女高潮一区二区-懂色av蜜臀av粉嫩av分享-小h片在线观看-台湾佬在线-日韩激情在线播放-欧日韩不卡在线视频-波多野结衣中文字幕一区-天天操夜夜草

熱門搜索:A549    293T 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 AKK菌
購物車 1 種商品 - 共0元
當前位置: 首頁 > 行業資訊 > 人臍靜脈內皮細胞(綠色GFP標記)(HUVEC-GFP)

人臍靜脈內皮細胞(綠色GFP標記)(HUVEC-GFP)

該細胞來源于人靜脈內皮,可在半固體培養基中形成克隆,在免疫抑制小鼠中不能形成腫瘤。人臍靜脈內皮細胞(綠色GFP標記)HUVEC-GFP通過慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因。
1 來源:人臍帶組織
2 形態:內皮細胞
3 含量:>1x106
4 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式
1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
2)存活
細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
3)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。
細胞接收后的處理
1 收到細胞后,請檢查發貨培養瓶的狀況,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時,最好在低倍鏡(45X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態的依據。
3 觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h
4 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象,如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。
5 懸浮細胞T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基)。
6)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞
收到細胞后第一次傳代建議1:2傳代 。   
一.人臍靜脈內皮細胞(綠色GFP標記)HUVEC-GFP培養基及培養凍存條件準備:
1 準備ECM培養基;優質胎牛血清,5%;添加對應因子;雙抗,1%
2 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%
3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜。第二天檢查細胞密度。
2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 6ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 細胞懸液按1215的比例分到新的含6ml培養基瓶中。
注:第一次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。
3細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
1細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
21000rpm離心分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。明舟生物(mingzhoubio)按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
主站蜘蛛池模板: 成人激情开心 | av尤物| 婷婷伊人五月 | h在线免费观看 | 折磨小男生性器羞耻的故事 | 久久99影院| 人妻 校园 激情 另类 | 官场艳妇疯狂性关系 | 亚洲精品尤物 | 九九九九国产 | 亚洲综合色网 | 成人午夜影视 | 亚洲精品视频一区二区 | 亚洲网址在线观看 | 在线播放一级片 | 天天久久综合网 | 夜夜cao | 欧美激情一区 | 私拍在线 | 国产激情第一页 | 天堂资源最新在线 | 国产口爆吞精一区二区 | 高潮一区二区三区乱码 | 欧美色插| 91精品国产色综合久久不卡电影 | 国产系列在线观看 | 久久不卡 | 少妇综合网| 国产女人呻吟高潮抽搐声 | 日本a v网站| 欧美一区二区久久久 | 亚洲蜜桃视频 | 精品视频区 | 日韩中文字幕精品视频 | 日韩欧美在线中文字幕 | 成年人免费在线视频 | 精品国产九九九 | 国产91啪 | 国产人妻久久精品一区二区三区 | av片免费播放| 91第一页| 国产色网 | 亚洲午夜av| 国产乱淫av公 | 国产成人久久久 | 精品在线播放视频 | 国产成人无码一区二区在线播放 | 超碰人人擦 | 久久9966| 26uuu成人网| 午夜久久久久久久久 | 91网页入口 | 亚洲精品久久久久久久久久久 | 蜜桃视频久久 | 亚洲美女视频在线 | 久久久国产精品视频 | 99久久精品免费看国产免费软件 | 毛片美女 | 午夜色影院| 黄色大片一级 | 成人av在线网站 | 色噜噜一区二区三区 | 手机看片福利在线 | 农村寡妇一区二区三区 | 中文字幕一区在线观看 | 成人资源在线观看 | www.亚洲激情 | 男女瑟瑟视频 | 欧美日韩精品亚洲精品 | 少妇日韩 | 日日夜夜添 | 在线91观看 | 成年人免费看视频 | 婷婷狠狠干 | 日本一区二区三区在线观看 | 韩国福利一区 | 美女av毛片 | 欧美高清hd | 欧美国产视频 | 色婷婷综合久久久中文字幕 | 伊朗做爰xxxⅹ性视频 | 国产又粗又大又爽 | 亚洲少妇毛片 | 古代黄色片 | 激情av网 | www欧美 | 色性网 | 久草手机在线观看 | 男生和女生一起差差差视频 | 俄罗斯黄色录像 | 毛片在线网 | 国产麻豆精品在线观看 | 好看的av网址 | 欧美综合视频 | 欧美啪啪网站 | 一级全黄裸体免费观看视频 | 内裤摩擦1v1h | 爽爽影院在线免费观看 | 五月六月婷婷 |