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小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞

一、小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞簡(jiǎn)介:

1. 產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞

2. 組織來(lái)源:肝臟組織

3. 產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4. 小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。通過(guò)控制激素調(diào)控的分泌和吸收,在保持、調(diào)整和擴(kuò)大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用,肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞在先天性和獲得性免疫應(yīng)答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞約占肝細(xì)胞總數(shù)的5%,其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復(fù)雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞具有復(fù)雜的生理代謝功能,參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過(guò)程,在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起一定的作用。研究表明,常見(jiàn)的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病,都是以肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞為病變靶位,進(jìn)而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此,了解正常肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的病理特征對(duì)研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機(jī)制、診斷和治療具有重要意義。 明舟生物(mingzhoubio生產(chǎn)的小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞采用膠原酶灌注消化法后,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5. 小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基信息:M199FBS、上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、HydrocortisoneInsulinTransferrinEpinephrinePenicillinStreptomycin

我們推薦使用小小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞專(zhuān)用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)基。

二、使用方法

在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞可傳1-2代;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

客戶(hù)收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀(guān)察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4) 細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀(guān)察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

四、注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。

5. 細(xì)胞只可用于科研。

備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考

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