細胞特性

1） 來源：巨噬細胞

2） 形態：多角形，貼壁生長

3） 含量：>1x106 個/T25 方瓶

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規格：T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝 

 

細胞接受后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將 T25 瓶置于 37℃培養約 2-3h。

3） 棄去 T25 瓶中的培養基，換用新鮮的完全培養基。

4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。

5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。 細胞用途：僅供科研使用。 

                        

明舟生物的細胞培養操作規程，供參考

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備 DMEM/F12 培養基，89%；優質胎牛血清，10%；P/S，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為 70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。

二、細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管迅速放入 37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解 凍，移入事先準備好的含有 4mL 培養基的 15ml 離心管中混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，加入 1mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有 5ml 培養基的培養瓶中 培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法： 1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS潤洗細胞 1-2次。 2. 加 2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培養箱中消 化 5-8分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅

 

速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入 5ml此細胞的培養基終止消化。 3. 輕輕吹打后吸出，移入 15ml離心管中，在 1200RPM條件下離心 5分鐘，棄去上清液，加入 10mL培養液后吹勻。 4. 每 5ml細胞懸液分裝到 2個 T-25培養瓶中進行培養。 3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細 胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的 1-3步驟進行，最后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計 數后離心，用血清重懸浮，加 DMSO至最終濃度為 10%。加入 DMSO后迅速混勻，按每 1ml的 數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于 1X106個細胞凍存。 

 

注意事項：  1. 收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。 2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢 液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。