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NCI-N87 [N87]
NCI-N87 [N87]
規格:
貨期:
編號:MZ-0132
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 NCI-N87 [N87]
商品貨號 MZ-0132
中文名稱 人胃癌細胞
細胞數量 1*10^6
組織來源 胃癌;肝轉移;男性
細胞種屬 Homo sapiens, human
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
生長特性 adherent
培養基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
形態特征 epithelial
傳代方法 1:3-1:5
細胞描述 NCI-N87細胞表達表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72,并且沒有左旋多巴胺脫羧酶(DDC)活性。它們的血管活性的腸肽(VIP)受體活性極低并缺乏胃泌激素受體。它們表達蕈毒堿膽堿受體。沒有證據表明存在N-myc,L-myc,myb和EGF受體基因的重組。這個細胞株表達的c-myc和c-erb-B2RNA水平與其它細胞株相當。以下基因不表達:N-myc,L-myc,c-cis,IGF-2,或胃泌激素釋放肽。報道NCI-N87細胞的植板率為4.3%。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中
復蘇細胞步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 :待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞凍存 Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase
細胞運輸 干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25細胞瓶)
姓名 手機號(微信同號) QQ
梅經理 17280875617 1438578920
胡經理 13345964880 2438244627
周經理 17757487661 1296385441
于經理 18067160830 2088210172
沈經理 19548299266 2662369050
李經理 13626845108 972239479
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