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人結腸癌組織源性原代細胞
人結腸癌組織源性原代細胞
規格:
貨期:
編號:MZ-4268
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 人結腸癌組織源性原代細胞
商品貨號 MZ-4268
組織來源 中國成年病人手術后的結腸癌組織。
規格 5×105cells/T25培養瓶
生長特性 貼壁
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
病理形態分析 1.腫塊型(菜花型、軟癌)結腸癌:腫瘤向腸腔內生長、瘤體較大,呈半球狀或球狀隆起,易 潰爛出血并繼發感染、壞死。該型多數分化較高,侵潤性小,生長較慢,好發于右半結腸。 2.侵潤型(縮窄型、硬癌)結腸癌:腫瘤環繞腸壁侵潤,有顯著的纖維組織反應,沿粘膜下生 長,質地較硬,易引起腸腔狹窄和梗阻。該型細胞分化程度較低,惡性程度高,出現轉移早。 好發右半結腸以遠的大腸。 3.潰瘍型結腸癌:腫瘤向腸壁深層生長并向腸壁外侵潤,早期即可出現潰瘍,邊緣隆起,底 部深陷,易發生出血、感染,并易穿透腸壁。細胞分化程度低,轉移早。是結腸癌中最常見 的類型,好發于左半結腸、直腸。
組織學分型 1.腺癌:大多數結腸癌是腺癌,約占四分之三,腺癌細胞可辨認,排列成腺管狀或腺泡狀, 按其分化程度可分為三級,Ⅲ級分化最差,細胞排列為片狀或索條狀。 2.粘液癌:癌細胞分泌粘液,在細胞內可將細胞核擠到一邊(狀似戒指,有稱作印戒細胞癌), 在細胞外可見間質內有粘液以及纖維組織反應,癌細胞在片狀粘液中似小島狀。分化低,予 后較腺癌差。 3.未分化癌:癌細胞小,形狀與排列不規則,易侵入小血管及淋巴管,侵潤明顯。分化很低, 愈后最差。
臨床分期 目前較為統一的結腸癌分期是Dukes 分期 Ⅰ期(Dukes A 期):結腸癌局限于腸壁內 A0 期:結腸癌局限于粘膜 A1 期:結腸癌局限于粘膜下層 A2 期:結腸癌侵及腸壁肌層未穿透漿膜 Ⅱ期(Dukes B 期):結腸癌侵潤至腸壁外 Ⅲ期(Dukes C 期):伴有淋巴腺轉移 C1 期:近處淋巴轉移(腸旁) C2 期:遠處淋巴轉移(系膜) Ⅳ期(Dukes D 期):結腸癌已有遠處轉移 www
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