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人直腸癌組織源性原代細胞
人直腸癌組織源性原代細胞
規格:
貨期:
編號:MZ-4269
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 人直腸癌組織源性原代細胞
商品貨號 MZ-4269
組織來源 中國成年病人手術后的直腸癌組織
規格 5×105cells/T25培養瓶
生長特性 貼壁
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
病理形態分析 1、直腸癌腫塊型:又稱菜花型癌。癌腫向腸腔內突出,浸潤腸壁少,癌腫增大時表面可產 生潰瘍,預后較差。 2、直腸癌潰瘍型:多見,占50%,向腸壁深層生長,并向四周浸潤,易出血,分化程度低, 較早轉移。 3、直腸癌狹窄型:少見,又稱浸潤性。癌腫沿腸壁蔓延浸潤,易引起腸壁狹窄,轉移早且 預后差。
組織學分型 1、管狀腺癌:癌組織細胞呈管狀樣結構。 根據分化程度,可分化為三級: (1)高分化腺 (2)中分化腺癌 (3)低分化腺癌 2、粘液腺癌:癌細胞中出現大量粘液。粘液成分占全部癌組織細胞60%以上,才能診斷為 粘液腺癌。60%一下則不屬于粘液腺癌,以粘液的多少來作為診斷標準,粘液腺癌大約占直 腸腺癌的20%左右。 3、乳狀腺癌:癌組織細胞呈粗細大小不等的乳頭狀結構,乳頭中央為中心索。 乳狀腺癌根據生長方式可分兩種: (1)腺癌組織細胞向粘膜表面生長呈絨毛狀腺瘤。 (2)腫瘤向深部腺腔內蔓延侵潤呈囊狀結構呈乳頭狀增生。 4、未分化癌:癌細胞比較小,呈團塊狀,形狀與排列不整齊,容易侵入細小血管及淋巴管 道中,侵潤比較明顯,分化程度比較低。
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